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PRODUCT CATEGORYPCR:即合(he)酶鏈(lian)式反應(Polymerase Chain Reaction),利(li)用DNA在體外(wai)95℃時解(jie)旋(變性),55℃時引(yin)物與單(dan)鏈按堿(jian)基(ji)互補配對的原則(ze)結合(退火(huo)),再(zai)調溫(wen)度(du)至72℃左右,DNA聚(ju)合酶(mei)沿著(zhu)磷酸到五(wu)碳糖(5'-3')的方向合(he)成互補(bu)鏈(延伸)。
PCR儀實(shi)際(ji)就是一個溫控設(she)備,能在95℃,55℃,72℃之間很好地進行溫度控制。
根據DNA擴增的(de)(de)目的(de)(de)和(he)檢測的(de)(de)標準可以將PCR儀分為:普通PCR儀(yi),梯度PCR儀,原位PCR,實時熒光定量PCR儀等幾(ji)類(lei)
普通PCR儀:
一般把一次PCR擴增只能運行一(yi)個特定退火(huo)溫度(du)的PCR儀,稱之為普通(tong)PCR儀,也就是傳統的PCR儀。如果(guo)要(yao)用它做不同(tong)的退火溫度(du)則需要(yao)多(duo)次運行。
普通PCR儀主要應用于科研(yan)、教學、臨床醫學、檢(jian)驗、檢(jian)疫等。
如:啟步BSW-2P,BSW-3P,BSW-6P-I/II ,ABI 2720型
更多詳情: 上海啟(qi)步生(sheng)物科技有限(xian)公司
梯度PCR儀:
一次性PCR擴增可以設置(zhi)一系列(lie)不同(tong)的(de)退火溫度條件(通常12種溫度梯度)的稱之(zhi)為(wei)梯度PCR儀。不同的(de)DNA片段其的退火溫度不(bu)同,通過設(she)置(zhi)一(yi)系列(lie)的梯度退火溫度進行擴增,從而一(yi)次性PCR擴增(zeng)就可以篩選出(chu)表達量高的退(tui)火溫(wen)度進(jin)行有效的擴增(zeng)。
梯度PCR儀主要用(yong)于研究(jiu)未知DNA退火(huo)溫度的(de)擴增,這樣既節(jie)(jie)約(yue)時(shi)間,也(ye)節(jie)(jie)約(yue)成本。在不設置梯度的(de)情況下亦可(ke)當做(zuo)普通的(de)PCR用。梯(ti)度PCR儀多應用于科研、教學機構,檢驗(yan)、檢疫等(deng)。
如(ru):啟(qi)步BSW-2T,BSW-3T,BSW-6T-I/II ,ABI 9700,ABI Veriti, Bio-Rad T100 PCR儀
更多詳情: 上海啟步(bu)生物科技有限公司(si)
原位PCR儀:
PCR是提取細(xi)胞(bao)或組織中的DNA進行(xing)基因擴增(zeng)反應,而原位PCR是(shi)保持細胞(bao)或組(zu)織的完(wan)整性,使PCR反應體系滲透到組織和細(xi)胞(bao)中,在細(xi)胞(bao)的靶DNA所在的(de)位置(zhi)上進(jin)行基因擴(kuo)增。不但可以檢測(ce)到靶(ba)DNA,而且還可以(yi)了(le)解靶(ba)DNA存(cun)在于何種細胞中,更有(you)利于探討靶DNA與細胞之間的關系(xi)。
原(yuan)位PCR儀(yi),主(zhu)要(yao)應用于:(1)檢(jian)測外源性基因片段(duan),提高檢(jian)出率,集中在病毒感(gan)染的檢(jian)查上(shang),如HIV、HPV、HBV、CMV等;(2)觀察病原(yuan)體(ti)(ti)在體(ti)(ti)內(nei)分布規(gui)律(3)內(nei)源性基因片段,如人體的(de)單基因病(bing)、重組基因、易(yi)位(wei)的(de)染色體、Ig的mRNA片段、癌(ai)基因片段等(deng)。(4)檢(jian)測(ce)導入基因;(5) 遺傳病基因檢(jian)測(ce)如β-地中海貧(pin)血。
實(shi)時熒光定量PCR儀:
在普(pu)通PCR儀設計基礎上增加(jia)熒光(guang)信號(hao)采(cai)集(ji)系(xi)統和計算機分析處(chu)理系(xi)統,形成了具(ju)有熒光(guang)定量功能的PCR儀器。其PCR擴增原理和普通PCR擴(kuo)增(zeng)原理(li)相同,在PCR擴(kuo)增時(shi)加入(ru)的引(yin)物(wu)是(shi)利用(yong)同位(wei)素、熒(ying)(ying)光素等進行標記,使用(yong)引(yin)物(wu)和(he)熒(ying)(ying)光探針(zhen)同時(shi)與(yu)模板特異性結(jie)合擴(kuo)增。擴(kuo)增的結(jie)果通過熒(ying)(ying)光信(xin)號采(cai)集系統實(shi)時(shi)采(cai)集信(xin)號連接(jie)輸(shu)送到計算(suan)機分析處理系統,得(de)出量化的實(shi)時(shi)結(jie)果輸(shu)出。
熒(ying)光定量PCR儀(yi)有單通(tong)道(dao)(dao)(dao),雙通(tong)道(dao)(dao)(dao)和多(duo)(duo)通(tong)道(dao)(dao)(dao)之分。當只用(yong)一(yi)(yi)種熒光(guang)(guang)探針標記(ji)的(de)(de)(de)時候,選用(yong)單通(tong)道(dao)(dao)(dao);有多(duo)(duo)種熒光(guang)(guang)標記(ji)的(de)(de)(de)時候使用(yong)多(duo)(duo)通(tong)道(dao)(dao)(dao)。單通(tong)道(dao)(dao)(dao)也可(ke)以檢測多(duo)(duo)熒光(guang)(guang)的(de)(de)(de)標記(ji)和目(mu)的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)表達產物,因(yin)為一(yi)(yi)次只能檢測一(yi)(yi)種目(mu)的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)的(de)(de)(de)擴增(zeng)量,需多(duo)(duo)次擴增(zeng)才能檢測完不同的(de)(de)(de)目(mu)的(de)(de)(de)基(ji)因(yin)片段的(de)(de)(de)量。多(duo)(duo)通(tong)道(dao)(dao)(dao)利于做(zuo)多(duo)(duo)重PCR,實現一次檢測多種目的基因的功能。
熒光定(ding)量(liang)PCR儀主要應用于臨床醫學檢測、生物醫藥研發、食品行業(ye)、科(ke)研院校等。熒光(guang)定量(liang)檢測技術在臨床診(zhen)斷(duan)(duan)方面很(hen)多(duo),主要集中在各種病(bing)原(yuan)體引起(qi)疾病(bing)的(de)臨床診(zhen)斷(duan)(duan),如肝炎(yan)類疾病(bing)、性病(bing)、與優(you)生優(you)育相關的(de)疾病(bing)以及肺結核等等。
文(wen)章(zhang)來源來:啟步生物
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